1.驗(yàn)證法規(guī)

新版GMP附錄1 無菌藥品：

第四十一條過濾器應(yīng)當(dāng)盡可能不脫落纖維。嚴(yán)禁使用含石棉的過濾器。過濾器不得因與產(chǎn)品發(fā)生反應(yīng)、釋放物質(zhì)或吸附作用而對產(chǎn)品質(zhì)量造成不利影響。

第七十五條非zui終滅菌產(chǎn)品的過濾除菌應(yīng)當(dāng)符合以下要求：

（四）過濾除菌工藝應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證，驗(yàn)證中應(yīng)當(dāng)確定過濾一定量藥液所需時(shí)間及過濾器二側(cè)的壓力。任何明顯偏離正常時(shí)間或壓力的情況應(yīng)當(dāng)有記錄并進(jìn)行調(diào)查，調(diào)查結(jié)果應(yīng)當(dāng)歸入批記錄。

（五）同一規(guī)格和型號的除菌過濾器使用時(shí)限應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證，一般不得超過一個(gè)工作日。

2.驗(yàn)證內(nèi)容

從法律的規(guī)定看，需要驗(yàn)證的內(nèi)容如下：

1）zui終滅菌制劑

需要驗(yàn)證：兼容性，溶出物，吸附性，選做“物料的完整性數(shù)據(jù)生成”。

需要確認(rèn)：無纖維脫落、潔凈度、生物安全性。

2）非zui終滅菌制劑

需要驗(yàn)證：兼容性，溶出物，吸附性，細(xì)菌生存性，細(xì)菌挑戰(zhàn)，選做“物料的完整性數(shù)據(jù)生成”。

需要確認(rèn)：無纖維脫落、潔凈度、生物安全性。

3.驗(yàn)證方法

3.1 兼容性分析

先將濾膜或?yàn)V芯浸泡在藥液中，在達(dá)到總計(jì)接觸時(shí)間之后，檢測濾膜或?yàn)V芯浸泡前后的變化，檢測指標(biāo)有：濾膜的完整性，水流速，重量，膜厚、濾芯的強(qiáng)度、外觀變化等物理參數(shù)。當(dāng)變化率小于規(guī)定的指標(biāo)時(shí)（目前尚無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，一般由濾芯廠家根據(jù)大量驗(yàn)證結(jié)果確定），確認(rèn)濾膜或?yàn)V芯的與藥液的兼容性。

3.2 溶出物分析

溶出物——Extractables，是指可以通過人工或超常規(guī)的力量（如溶劑、溫度、或時(shí)間）去除的一種化學(xué)物質(zhì)。

析出物——Leachables，是指在儲(chǔ)存或正常使用條件下，可以從接觸表面遷移進(jìn)入藥品或工藝流體的一種化學(xué)組分。

一般認(rèn)為析出物是溶出物的子集。

溶出物的分析方法有：NVR法、TOC法、RP-HPLC法等。

溶出物驗(yàn)證的目的是證明濾芯在藥液中的溶出物屬于濾芯固有的物質(zhì)，排除濾芯遭受外源污染的可能性，并且證明這種溶出物是安全的。

濾芯的溶出物驗(yàn)證需要濾芯本身通過如下驗(yàn)證：

1）濾芯本身材質(zhì)符合食品接觸級塑料要求或飲用水設(shè)備衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。

2）濾芯通過生物安全性測試（USP<88>或中國藥典二部規(guī)定的異常毒性測試）。

3.3 吸附驗(yàn)證

當(dāng)藥液的成分對其藥效非常重要，而濾芯可能產(chǎn)生很強(qiáng)的吸附時(shí)需要做吸附驗(yàn)證。一般由濾芯使用者自行完成。

部分過濾器對產(chǎn)品的吸附作用極小，或產(chǎn)品吸附對產(chǎn)品活性成分影響極小時(shí)，吸附評估僅需要產(chǎn)品與濾芯小規(guī)模接觸后，得到影響極小的結(jié)論，并不需要作出吸附曲線。

若經(jīng)評估濾芯的吸附對產(chǎn)品影響很大，則需要建立預(yù)吸附飽和方案。

3.4 細(xì)菌生存性

細(xì)菌生存性試驗(yàn)是細(xì)菌挑戰(zhàn)的前提，其目的是尋找細(xì)菌挑戰(zhàn)可能的驗(yàn)證方案。根據(jù)生存性結(jié)果的不同，將料液和工藝定性為殺菌、中度殺菌、或非殺菌。與料液接觸工藝時(shí)間后，細(xì)菌logTr <1（死亡率<90％）的產(chǎn)品屬于非殺菌性產(chǎn)品；與料液接觸60min內(nèi)，細(xì)菌logTr >1 （死亡率>90%）的產(chǎn)品屬于殺菌性產(chǎn)品；與料液接觸60min內(nèi)，細(xì)菌logTr <1（死亡率<90％），同時(shí)與料液接觸工藝時(shí)間后，細(xì)菌logTr >1（死亡率>90%）的產(chǎn)品屬于中度殺菌產(chǎn)品。

3.5 細(xì)菌挑戰(zhàn)

細(xì)菌挑戰(zhàn)適用于除菌過濾工藝驗(yàn)證。

除菌級過濾器是指能夠?yàn)V除所有微生物，下游得到無菌無菌濾出液的過濾器。

除菌過濾工藝的物理檢測手段是濾芯的完整性檢測，生物指示劑為B. dimininuta，ATCC 19146，挑戰(zhàn)水平不低于10⁷CFU/cm2。

根據(jù)生存性結(jié)果，殺菌性產(chǎn)品和非殺菌性產(chǎn)品的挑戰(zhàn)方式不同，非殺菌性產(chǎn)品直接接種細(xì)菌后挑戰(zhàn)，殺菌性產(chǎn)品需要在產(chǎn)品循環(huán)后沖洗，再清除產(chǎn)品殘留后再用替代液挑戰(zhàn)。

3.6 物料完整性數(shù)據(jù)生成

物料完整性數(shù)據(jù)生成不屬于法律強(qiáng)制要求驗(yàn)證的內(nèi)容，其驗(yàn)證目的是使用產(chǎn)品代替水作為潤濕液，從而簡化完整性測試的程序。該驗(yàn)證非常適合滅菌后濾芯的完整性檢測和不能與水接觸物料的完整性檢測，但產(chǎn)品完整性數(shù)據(jù)生成的前提是產(chǎn)品是穩(wěn)定的，揮發(fā)性適當(dāng)?shù)娜芤海瑧覞嵋骸?qiáng)揮發(fā)性溶液等無法進(jìn)行相關(guān)驗(yàn)證。產(chǎn)品完整性數(shù)據(jù)生成的結(jié)果必須得到細(xì)菌挑戰(zhàn)的驗(yàn)證。